合理的標(biāo)本采集對(duì)保證標(biāo)本的完整性和核酸的定性/定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性是至關(guān)重要的。標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格按照適當(dāng)?shù)纳锇踩改线M(jìn)行采集,不合適的標(biāo)本處理會(huì)導(dǎo)致核酸降解,產(chǎn)生錯(cuò)誤的患者檢測(cè)結(jié)果。
1. 標(biāo)本識(shí)別
標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)明確患者身份及其標(biāo)本,充分尊重患者隱私。同時(shí)應(yīng)為醫(yī)療人員提供合理而充足的檢測(cè)和治療相關(guān)的信息。標(biāo)本應(yīng)牢固地貼上標(biāo)簽,內(nèi)容至少包括:識(shí)別號(hào)、采集日期和時(shí)間、標(biāo)本采集者姓名、標(biāo)本來源等。
2. 申請(qǐng)單信息
申請(qǐng)單至少包括以下幾點(diǎn)信息:標(biāo)識(shí)號(hào)、入院登記號(hào)、患者姓名、出生日期、性別、種族、采集日期、標(biāo)本類型、相關(guān)的臨床和實(shí)驗(yàn)室信息、醫(yī)生姓名、標(biāo)本采集的部門、檢測(cè)申請(qǐng)?jiān)虻取?/p>
3. 標(biāo)本采集
采集人體組織或體液標(biāo)本時(shí)應(yīng)遵守相關(guān)的安全防范措施,佩戴手套,預(yù)防標(biāo)本中血源性病原體的傳播,同時(shí)阻止標(biāo)本被處理人員的脫落細(xì)胞污染。特定的檢測(cè)方法可能需要額外的預(yù)防措施和采集說明,如HPV檢測(cè)采集宮頸標(biāo)本應(yīng)在醋酸試驗(yàn)之前。實(shí)驗(yàn)室采用不同的檢測(cè)方法時(shí)應(yīng)考慮潛在的干擾和污染來源,正確指導(dǎo)和培訓(xùn)臨床醫(yī)生按照特定方法或檢測(cè)體系的標(biāo)本采集要求進(jìn)行采集。臨床實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后應(yīng)盡快將標(biāo)本信息輸入至實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)(LIS),同時(shí)應(yīng)盡快處理接收的標(biāo)本。如果標(biāo)本存在如溶血、冰凍血液或標(biāo)記不當(dāng)?shù)惹闆r應(yīng)考慮拒收。
4. 抗凝劑
血液和骨髓穿刺(BMA)標(biāo)本采集應(yīng)使用合適的抗凝管或含其他添加劑的試管。試管添加劑的選擇應(yīng)根據(jù)分析物類型、試驗(yàn)、標(biāo)本量而定,有研究表明肝素和亞鐵血紅素可能會(huì)抑制PCR反應(yīng)。因此,推薦使用EDTA和ACD抗凝劑檢測(cè)血漿或骨髓穿刺標(biāo)本。如果被測(cè)量為細(xì)胞內(nèi)RNA,采集血液或骨髓的設(shè)備應(yīng)包含RNA穩(wěn)定劑,或者在采集后立即加入RNA穩(wěn)定溶液。
5. 組織標(biāo)本
如果無法獲得血液或口腔黏膜細(xì)胞(如患者死亡),或者組織標(biāo)本的基因型同血液或口腔黏膜細(xì)胞不同,或者組織為某些潛在感染物質(zhì)核酸的來源時(shí),可采用組織標(biāo)本。通常最佳的組織量為1-2g,但由于各種組織所含的DNA和RNA的量不同,采集組織的量也因組織而異。多細(xì)胞組織如骨髓、淋巴結(jié)、脾適用于基因組DNA檢測(cè),需要的組織量較少。少細(xì)胞標(biāo)本如肌肉、纖維、脂肪組織不是基因組DNA的最佳來源,采集量最好大于1-2g。通常,如果沒有廣泛脂肪浸潤,大于10mg的組織至少獲得10μg的RNA或DNA。不同組織的蛋白質(zhì)的量和類型各不相同,核酸分離方法也因組織而異。按照特定來源的組織,根據(jù)廠家建議分離DNA或RNA。
病理科醫(yī)生通常從大塊組織中采取有代表性的部分組織進(jìn)行固定、染色、顯微鏡檢測(cè)和病理診斷,或者選擇有代表性的組織提取DNA或RNA進(jìn)行分子學(xué)分析。一般選擇病灶組織進(jìn)行檢測(cè)、非病灶組織作為對(duì)照。對(duì)照組織對(duì)某些分子檢測(cè)是至關(guān)重要的,如雜合性缺失分析或微衛(wèi)星不穩(wěn)定性試驗(yàn)。
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